艾滋病的酶聯免疫分析
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酶聯免疫吸附測定法酶聯免疫測定方法是以抗原和抗體分子爲測定靶標的方法,亦是目前最爲常用的實驗室診斷方法之一。
從理論上說,一種生物或生理活性物質,只要有辦法得到其特異的抗體,就可以建立這種物質的酶聯免疫測定方法。在以前看來一些難以進行質量測定的微量生物活性物質,如受體、細胞因子以及酶等均可使用酶聯免疫測定技術來測定。酶聯免疫測定方法是以抗原抗體間的特異反應爲基礎的,其與生化的化學反應有着本質的區別,並且由於標記物如同位素、酶、熒光素、微量元素、發光物質等的摻人,酶聯免疫測定技術從低靈敏的免疫沉澱和免疫凝集反應進入到了高靈敏的放射免疫、酶免疫、熒光免疫和發光免疫測定時代,可見酶聯免疫測定更多的是用於生物活性物質的微量測定。
目前在上,很多重要的疾病診斷標誌物均使用酶聯免疫測定方法來檢測,如抗HAVIgM,乙肝“兩對半”、抗HCV,抗HIV,梅毒抗體、優生優育TORCH系列、性病病原體的抗原或抗體等傳染性病原體血清標誌物、激素、腫瘤標誌物、自身抗體、特種蛋白、細胞因子和治療藥物以及HBVDNA,HCV-RNA,遺傳病基因、腫瘤基因、基因突變等,這些標誌物的檢測質量直接關係到患者的診斷和治療。
而在血站,HBsAg,抗HCV,抗HIV和梅毒抗體等標誌物的檢測,哪怕是1%的錯誤,對將要接受輸血的特定患者來說,就是100%的災難。近期,在電視、報紙等新聞媒體中,常可見到一些有關醫患糾紛的報道,其中一些就與酶聯免疫測定有關,如輸血後丙肝病毒、艾滋病毒感染的發生,性病檢測的假陽性等。可見,酶聯免疫測定的質量控制有多麼重要。
酶聯免疫吸附測定法-ELISA的應用
ELISA應用的範圍很廣,而且正在不斷地擴大,原則上ELISA可用於檢測一切抗原、抗體及半抗原,可以直接定量測定體液中的可溶性抗原。酶免疫試驗(EIA)結合光學顯微鏡或電子顯微鏡可進行抗原定位與結構的研究,用酶標記抗原或抗體結合免疫擴散及免疫電泳可提高試驗的敏感性。在實際應用方面可作疾病的臨牀診斷、疾病監察、疾病普查、法醫檢查、獸醫及農業上的植物病害的診斷檢定等。因此,它和生物化學、免疫學、微生物學、藥理學、流行病學及傳染病學等方面密切相關。檢查抗原和半抗原方面:在內分泌方面已經用於檢測雌性激素、絨毛膜促性腺激素、黃體素、胰島素、皮質醇、促甲狀腺素和孕酮等,其敏感性與RIA相當,在血液學方面可用於檢查凝固因子(如第Ⅷ凝固因子)、紅細胞抗原及結合球蛋白(HaptoGlobin)等,在腫瘤方面已試用檢查甲胎蛋白(AFP)癌胚抗原(CEA),對前者的敏感性已達到與放射免疫試驗相當的水平,但對CEA檢查的敏感性較低,目前尚不能用於常規診斷,在傳染病的診斷方面正在日益擴大,其中最滿意的是用於檢查乙型肝炎表面抗原。國內外已有ELISA檢測的商品供應。尚有用於檢查霍亂弧菌、大腸肝菌、綠膿桿菌和破傷風梭菌毒素;腦膜炎球菌及淋球菌抗原;檢查免疫抑制病人中常見的白色念殊菌抗原,檢查病人或病獸的糞便中的輪狀病毒,自病人標本中檢查甲肝病毒、皰疹病毒、麻疹病毒、流感、呼吸道融合及鉅細胞病毒等。還可用於植物組織漿液中檢查植物病毒。此外尚試用於測鉤體抗原及血吸蟲病的循環抗原等。在免疫化學方面可用於檢測白蛋白,免疫球蛋白的各種組份,也可用於檢測補體成份,如:ciq,還能用於檢測蛇毒。
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